Mutation hétérozygote de CARD9 favorise le développement de l’aspergillose broncho-pulmonaire allergique
L’aspergillose broncho-pulmonaire allergique (ABPA) est une pathologie d’hypersensibilité complexe déclenchée par une réponse immunitaire contre Aspergillus fumigatus (Af) chez des patients asthmatiques ou atteints de mucoviscidose. Elle se caractérise par une élévation des taux d’immunoglobuline E (IgE) totale, une éosinophilie et une inflammation médiée par les lymphocytes T auxiliaires de type 2 (TH2). Bien que des facteurs génétiques et environnementaux contribuent à la susceptibilité à l’ABPA, des études récentes soulignent le rôle de la protéine adaptatrice CARD9 (Caspase Recruitment Domain Family Member 9), clé dans l’immunité antifongique, dans la modulation des réponses immunitaires. Cette étude démontre que la mutation hétérozygote g.136372044G>A (p.S12N) de CARD9 prédispose à l’ABPA en induisant un déséquilibre d’expression allélique (AEI) et en amplifiant les réponses TH2 spécifiques à Af.
Association génétique de CARD9 p.S12N avec l’ABPA
Une étude cas-témoins incluant 61 patients ABPA, 108 patients asthmatiques et 156 témoins sains (HCs) a analysé le locus CARD9. Le polymorphisme p.S12N (rs4077515) était significativement associé à la susceptibilité à l’ABPA. Parmi les patients ABPA, 55,7 % (34/61) étaient porteurs du génotype hétérozygote GA et 9,8 % (6/61) du génotype homozygote AA. En revanche, la fréquence du génotype GA était plus basse chez les HCs (36,1 % chez les HCs non allergiques, 32,4 % chez les HCs allergiques) et les patients asthmatiques (34,9 % dans l’asthme sensibilisé à Af, 33,8 % dans l’asthme non sensibilisé). Une régression logistique a confirmé que les génotypes GA (OR : 2,69 ; IC 95 % : 1,39–5,20) et AA (OR : 4,17 ; IC 95 % : 1,16–15,04) augmentaient le risque d’ABPA par rapport aux HCs non allergiques. Les patients ABPA présentaient des taux d’IgE totale (médiane : 2 435 UI/mL), d’éosinophiles (1,06 × 10⁹ cellules/L) et d’IgE spécifiques à Af (1,09 kUA/L) supérieurs à ceux des autres groupes (P <0,001).
Déséquilibre d’expression allélique chez les patients ABPA
Le pyroséquençage des cellules mononucléées du sang périphérique (PBMC) a révélé un AEI chez les porteurs hétérozygotes de CARD9 S12N. Chez les patients ABPA (n=10), l’allèle mutant A était majoritairement exprimé (75–90 % de l’ARNm total de CARD9), contrairement aux HCs (n=22) où les deux allèles étaient équilibrés (∼50 % chacun). Ce déséquilibre était exacerbé par l’exposition à Af : dans les PBMC de porteurs GA sains, Af augmentait l’expression de l’allèle mutant de 60 % à 80 % (P <0,05). Ces résultats suggèrent que l'AEI induite par Af favorise l'expression de l'allèle mutant, perturbant la régulation immunitaire.
Mécanismes de polarisation TH2 par CARD9 S12N
Des analyses fonctionnelles ont montré que la mutation S12N altère la stabilité de l’ARNm et la production de cytokines. La qRT-PCR a révélé une expression accrue de CARD9 dans les PBMC des patients ABPA porteurs de GA/AA versus GG (P <0,01). La dégradation de l'ARNm sauvage sous stimulation par Af était plus rapide que celle des transcrits mutants. Dans les macrophages dérivés de moelle osseuse (BMDM) de souris Card9 S12N, la dégradation de l’ARNm sous stimulation par Af était ralentie chez les hétérozygotes (Het) et homozygotes (Homo) versus le type sauvage (WT) (P <0,05 à 4 heures).
La cytométrie en flux des PBMC de patients ABPA a montré une production accrue d’IL-5 par les monocytes CD11b⁺CD14⁺ chez les porteurs GA (6,8 % vs 1,2 % chez les GG ; P <0,001). Les BMDM de souris Het sécrétaient plus d'IL-5 (312 pg/mL vs 120 pg/mL ; P <0,01) et d'IL-4 (45 pg/mL vs 18 pg/mL ; P <0,05) après exposition à Af, confirmant une polarisation TH2 exacerbée.
Validation in vivo dans des modèles murins
Des modèles d’exposition chronique et aiguë à Af chez la souris ont validé le rôle pathogène de la mutation Card9 S12N hétérozygote. Dans un modèle d’asthme chronique (doses répétées de Af), les souris Het présentaient une éosinophilie pulmonaire accrue (2,1 × 10⁶ vs 1,2 × 10⁶ cellules chez les WT ; P <0,01), des taux sériques d'IgE (1 850 ng/mL vs 980 ng/mL ; P <0,001) et d'IL-5 pulmonaire (95 pg/mL vs 40 pg/mL ; P <0,001) supérieurs. Une dose unique élevée de conidies (5 × 10⁷) induisait également des réponses TH2 plus fortes chez les Het, avec une IL-5 pulmonaire 3,5 fois plus élevée et un recrutement accru de cellules TH2 (CD3⁺CD4⁺ICOS⁺ST2⁺) versus WT (P <0,001). Les neutrophiles restaient inchangés, soulignant la spécificité TH2 de la mutation.
Implications cliniques et thérapeutiques
Cette étude identifie CARD9 S12N comme un marqueur génétique de susceptibilité à l’ABPA, particulièrement chez les hétérozygotes. L’AEI et la stabilisation de l’ARNm mutant expliquent la dominance allélique, conduisant à des réponses TH2 excessives. Ces mécanismes éclairent l’hyper-IgE et l’éosinophilie observées dans l’ABPA. Les futures thérapies ciblant CARD9 ou ses effecteurs (comme la voie NF-κB non canonique) pourraient atténuer la pathologie TH2 chez les patients prédisposés.
Conclusion
La mutation hétérozygote CARD9 S12N favorise l’ABPA via une surexpression allèle-spécifique et une dégradation altérée de l’ARNm, exacerbant l’inflammation TH2 dominée par l’IL-5. Ces résultats relient susceptibilité génétique et dysrégulation immunitaire, ouvrant des perspectives pour le diagnostic et les interventions ciblées dans l’ABPA.
doi.org/10.1097/CM9.0000000000002786