Le microARN-139-5p suppresseur de tumeur inhibe les propriétés de la lignée cellulaire ECV-304 du cancer de la vessie via le ciblage de la connexine 43
Le cancer de la vessie (CV) représente l’une des tumeurs malignes les plus fréquentes du système urinaire, avec 549 393 nouveaux cas recensés en 2018. Malgré les progrès dans les approches diagnostiques, l’imagerie, les techniques chirurgicales, la chimiothérapie et les marqueurs tumoraux urinaires, le taux de survie à 5 ans du CV reste peu amélioré. Cela souligne la nécessité d’étudier les mécanismes sous-jacents du CV pour développer des traitements plus efficaces. Les connexines (CX), notamment la connexine 43 (CX43), sont surexprimées dans divers cancers, y compris le CV. Cependant, les mécanismes moléculaires impliquant les microARN (miARN) en amont de CX43 dans le CV restent mal compris. Cette étude se concentre sur le rôle du miR-139-5p en tant que suppresseur de tumeur dans le CV et son interaction avec CX43.
L’analyse bioinformatique via les logiciels miRanda, miRWalk, TargetScan et miRDB a identifié 120 miARN régulateurs potentiels en amont de CX43. Les données de la base TCGA (The Cancer Genome Atlas) ont révélé 22 miARN sous-exprimés dans le CV. L’intersection de ces ensembles a désigné le miR-139-5p comme candidat régulateur de CX43. L’expression du miR-139-5p, évaluée dans les tissus tumoraux et adjacents via TCGA, s’est avérée significativement plus faible dans les tumeurs (2,286 ± 0,017 vs 3,211 ± 0,034 ; t = 11,540, P < 0,0001).
Des analyses par qRT-PCR sur des lignées cellulaires de CV (5637, T24, ECV-304) et une lignée épithéliale vésicale immortalisée (SV-HUC-1) ont confirmé une sous-expression du miR-139-5p dans toutes les lignées cancéreuses, avec un minimum observé dans ECV-304. La transfection de miR-139-5p dans ECV-304 a réduit la prolifération (CCK-8 : P = 0,001), l’invasion (Transwell : P = 0,001) et la migration (P = 0,001), confirmant son rôle suppresseur.
Un test de luciférase a démontré que le miR-139-5p cible directement CX43 : l’activité luciférase du vecteur CX43-wt a diminué (0,916 ± 0,063 vs 0,356 ± 0,048 ; P = 0,002), contrairement au mutant CX43-mut (0,918 ± 0,057 vs 0,878 ± 0,039 ; P = 0,595). La qRT-PCR et le Western blot ont confirmé une réduction de l’ARNm (P = 0,005) et de la protéine CX43 (P = 0,002) après surexpression de miR-139-5p.
Une expérience de sauvetage avec inhibition de CX43 (si-CX43) a renforcé les effets anti-prolifératifs (P < 0,01), anti-invasifs (P = 0,028) et anti-migratoires (P = 0,014) du miR-139-5p, validant que son rôle suppresseur passe par CX43.
Les connexines, dont CX43, forment des canaux intercellulaires modulant la communication directe. Une régulation aberrante des connexines est impliquée dans divers cancers. Bien que CX43 soit sous-exprimée dans des tumeurs solides (sein, ovaire, poumon), sa surexpression dans le CV suggère un rôle pro-tumoral. Les miARN, comme le miR-139-5p, régulent l’expression génique en se liant à la région 3’UTR des ARNm cibles. Le miR-139-5p, déjà identifié comme suppresseur dans d’autres cancers, émerge ici comme une cible thérapeutique prometteuse pour le CV.
En conclusion, cette étude montre que le miR-139-5p, sous-exprimé dans le CV, inhibe la prolifération, l’invasion et la migration des cellules cancéreuses en ciblant CX43. Ces résultats soulignent le potentiel thérapeutique du miR-139-5p et de CX43, bien que des études in vivo et sur d’autres modèles cellulaires soient nécessaires pour valider ces applications cliniques.
doi.org/10.1097/CM9.0000000000000455