Le gène 1 élevé dans les astrocytes (AEG-1) est une cible du miR542 pour favoriser la prolifération et l’invasion du glioblastome
Le gliome est la tumeur maligne la plus fréquente du système nerveux central, représentant environ 40 à 60 % des tumeurs intracrâniennes. Le glioblastome multiforme (GBM), qui constitue près de la moitié des gliomes, est une maladie multigénique résultant d’une régulation anormale des réseaux géniques contrôlant l’homéostasie et la différenciation cellulaire. Malgré les stratégies thérapeutiques combinant la résection tumorale et la chimioradiothérapie postopératoire, le taux élevé de récidive et l’efficacité limitée des traitements conventionnels restent des défis majeurs dans la prise en charge du GBM.
La transition épithélio-mésenchymateuse (TEM) joue un rôle clé dans l’invasion tumorale et les métastases, influençant la carcinogenèse et la progression cancéreuse. Les microARN (miARN) sont impliqués dans la régulation de la TEM via leurs gènes cibles. Le miR542 a été associé à la TEM et à divers cancers, mais ses fonctions et mécanismes dans le GBM demeurent peu explorés. Cette étude examine l’impact d’AEG-1 sur l’agressivité, la prolifération, l’apoptose et le cycle cellulaire des cellules U251, ainsi que le rôle fonctionnel du miR542 dans le GBM.
La lignée cellulaire humaine de GBM U251 a été utilisée. Les cellules ont été cultivées en milieu DMEM supplémenté avec 10 % de sérum fœtal bovin désactivé, de pénicilline et de streptomycine. Des mimétiques de miARN et des siRNA ciblant AEG-1 ont été transfectés à l’aide de Lipofectamine RNAiMAX. La prolifération a été évaluée par test CCK-8, la migration et l’invasion par des chambres de Transwell, et le cycle cellulaire et l’apoptose par cytométrie en flux. L’interaction entre miR542 et AEG-1 a été confirmée par test luciférase, et les niveaux d’expression des protéines et ARNm par western blot et RT-PCR.
L’inhibition d’AEG-1 via siRNA (si-AEG1) a réduit significativement son expression aux niveaux ARNm et protéique. Les cellules déficientes en AEG-1 ont montré une diminution de l’agressivité, une inhibition de la prolifération avec arrêt en phase G1/S, et une augmentation de l’apoptose, suggérant qu’AEG-1 favorise les phénotypes malins.
L’analyse des profils d’expression des miARN par séquençage profond a identifié trois miARN candidats (miR128, miR520c, miR542) surexprimés dans des échantillons de GBM. Parmi eux, le miR542 a montré l’effet le plus marqué sur la réduction de la migration et de la prolifération des cellules U251. Le test CCK-8 a confirmé une inhibition significative de la prolifération sous l’effet du miR542.
Les outils bioinformatiques ont prédit AEG-1 comme cible du miR542. Le test luciférase a validé cette interaction, montrant une réduction d’activité luciférase liée à la liaison du miR542 sur la région 3’-UTR d’AEG-1. Une mutation du site de liaison a aboli cet effet. De plus, la transfection de miR542 a entraîné une diminution de l’expression d’AEG-1 et une régulation inverse des marqueurs de TEM : augmentation d’E-cadhérine et diminution de vimentine.
Ces résultats démontrent que le miR542 inhibe la migration, la prolifération et la TEM des cellules U251 en ciblant AEG-1, agissant comme un suppresseur de tumeur dans le GBM. Cette découverte souligne le potentiel thérapeutique du miR542 dans le traitement des gliomes.
En conclusion, le miR542 régule les phénotypes malins du GBM via la suppression d’AEG-1 et de la TEM. Cette étude ouvre de nouvelles perspectives pour le développement de stratégies thérapeutiques ciblées contre le GBM.
doi.org/10.1097/CM9.0000000000001072