H19 recrute le lecteur de N6-méthyladénosine (m6A) YTHDF1 pour promouvoir la traduction de SCARB1 et faciliter l’angiogenèse dans le cancer gastrique
Le cancer gastrique (CG) demeure un problème majeur de santé mondiale, se classant au cinquième rang des cancers les plus fréquemment diagnostiqués et au troisième rang des causes de décès liés au cancer. Le pronostic des patients reste sombre, principalement en raison d’un diagnostic tardif et d’une propension élevée aux métastases lymphatiques. L’angiogenèse, processus de formation de nouveaux vaisseaux sanguins à partir de vaisseaux préexistants, joue un rôle crucial dans la croissance tumorale et les métastases. Comprendre les mécanismes moléculaires sous-jacents est essentiel pour développer des stratégies thérapeutiques efficaces. Cette étude explore le rôle de l’ARN long non codant (lncRNA) H19 dans la promotion de l’angiogenèse dans le CG, en se focalisant sur son interaction avec le lecteur de N6-méthyladénosine (m6A) YTHDF1 et le récepteur éboueur de classe B membre 1 (SCARB1).
H19 est surexprimé dans les tissus de CG et corrélé à l’angiogenèse
Une analyse immunohistochimique du marqueur vasculaire CD34 sur 30 paires de tissus de CG et normaux adjacents a révélé une densité microvasculaire (DMV) significativement plus élevée dans les tumeurs. Les données bioinformatiques issues de la base TANRIC ont prédit une surexpression de H19 dans le CG, confirmée sur 48 paires de tissus frais. Une forte expression de H19 était positivement corrélée à la DMV, et les patients avec un H19 élevé présentaient une survie globale réduite. L’expression de H19 a également été validée dans des lignées cellulaires de CG, avec un niveau maximal dans les cellules BGC-823.
H19 promeut la prolifération, la migration et l’angiogenèse des cellules de CG
Des expériences fonctionnelles ont montré que l’inhibition de H19 via un ARN interférent (si-H19) réduisait la prolifération, la migration et la formation de tubes vasculaires par les cellules endothéliales (HUVECs), tandis que la surexpression de H19 (pcDNA-H19) augmentait ces paramètres. Les gènes angiogéniques MMP9, VEGFA et ANGII étaient régulés par H19. In vivo, des souris nude injectées avec des cellules BGC-823 transfectées par sh-H19 présentaient des tumeurs plus petites, une prolifération réduite (marquage Ki-67) et une angiogenèse atténuée (CD34 et VEGF).
SCARB1 est une cible en aval de H19
Un séquençage haut débit après inhibition de H19 a identifié SCARB1 comme le gène le plus sous-exprimé. SCARB1, codant pour la protéine SR-BI, était surexprimé dans les tissus tumoraux et corrélé à H19. Son inhibition a bloqué la prolifération et l’angiogenèse, et des expériences de sauvetage ont montré que SCARB1 restaure partiellement les effets oncogéniques de H19.
Mécanisme de régulation par YTHDF1 et m6A
H19 interagit directement avec YTHDF1 dans le cytoplasme, comme démontré par des tests d’immunoprécipitation de l’ARN (RIP) et de pull-down. YTHDF1 reconnaît les modifications m6A dans la région 3′-UTR de l’ARNm de SCARB1, facilitant sa traduction sans affecter sa stabilité. Des assays Me-RIP ont confirmé la présence de m6A sur SCARB1.
Régulation amont par HIF-1α
HIF-1α, surexprimé dans les tissus de CG, se lie aux éléments de réponse à l’hypoxie (HRE) dans le promoteur de H19, activant sa transcription. L’inhibition de HIF-1α réduit l’expression de H19 et altère la progression tumorale, effets réversibles par la surexpression de H19.
Conclusion
Cette étude révèle un axe HIF-1α/H19/YTHDF1/SCARB1 dans l’angiogenèse du CG. H19 recrute YTHDF1 pour lire les modifications m6A sur SCARB1, stimulant sa traduction en SR-BI. Ces résultats soulignent le potentiel thérapeutique de cibler cette voie pour inhiber l’angiogenèse et améliorer le pronostic des patients.
doi.org/10.1097/CM9.0000000000002722