Évaluation de l’immunogénicité et de l’efficacité protectrice de la protéine OmcB de Chlamydia muridarum et de son segment C chez des souris BALB/c
Chlamydia trachomatis (Ct) est une bactérie intracellulaire obligatoire qui infecte le système urogénital humain, entraînant des pathologies telles que la cervicite, la salpingite et les maladies inflammatoires pelviennes. Bien que les antibiotiques puissent traiter efficacement les infections à Ct, l’émergence de résistances et la persistance des infections posent des défis majeurs pour le diagnostic et le traitement. Ainsi, le développement de vaccins efficaces est considéré comme la stratégie la plus fiable pour contrôler ces infections. Parmi les candidats vaccinaux, la protéine OmcB de la membrane externe de Chlamydia a retenu l’attention en raison de sa forte conservation et de son immunodominance. OmcB peut être clivée en segments C et N, le segment C-terminal (OmcBc) étant libéré dans le cytosol des cellules hôtes. Le sérum de patients infectés reconnaît fortement OmcBc, suggérant son rôle en tant que région immunodominante chez l’humain. De plus, OmcBc est reconnu par les lymphocytes T CD4+ et CD8+, ce qui en fait un candidat vaccin prometteur. Cette étude vise à évaluer l’immunogénicité et l’efficacité protectrice d’OmcB et d’OmcBc dans un modèle murin d’infection par Chlamydia muridarum, avec les adjuvants CpG-1826 et l’adjuvant de Freund (FA).
Protocole d’expression et d’immunisation
OmcB et OmcBc, marqués par une étiquette His, ont été exprimés dans un système procaryote. Des souris BALB/c femelles âgées de cinq semaines ont été réparties aléatoirement en sept groupes (n = 8) : OmcB:CpG, OmcBc:CpG, CpG seul, OmcB:FA, OmcBc:FA, FA seul et un groupe témoin non traité. Les groupes CpG ont reçu des injections intrapéritonéales de 20 µg de CpG + 30 µg de protéine ou de CpG seul, tandis que les groupes FA ont reçu 30 µg de FA + 30 µg de protéine ou de FA seul. Les immunisations ont été réalisées aux jours 0, 14 et 28. Trois souris par groupe ont été sacrifiées 28 jours après la dernière immunisation pour collecter le sérum et la rate.
Évaluation de la réponse immunitaire
Les taux sériques d’IgA, d’IgG, d’IgG1 et d’IgG2a ont été mesurés par ELISA. La prolifération des cellules spléniques a été évaluée par le test CCK-8, et les niveaux d’IL-10 et d’IFN-γ dans le surnageant des cultures ont été quantifiés par ELISA. Les résultats montrent qu’OmcB et OmcBc induisent des taux élevés d’anticorps IgG spécifiques comparés aux groupes témoins. Les ratios IgG2a/IgG1 supérieurs à 1 indiquent une réponse de type Th1. L’index de stimulation des splénocytes du groupe OmcBc était significativement plus élevé que celui des groupes témoins (P < 0,01). Les niveaux d’IFN-γ induits par OmcBc:CpG et OmcBc:FA étaient significativement plus élevés que dans le groupe témoin (P < 0,05 ou P < 0,01). De même, les taux d’IL-10 étaient aussi augmentés (P < 0,01).
Infection et analyse pathologique
Après immunisation, les souris ont été infectées par voie vaginale avec 2,0 × 10⁵ unités formant des inclusions (IFU) de corps élémentaires de C. muridarum. L’excrétion d’IFU a été suivie aux jours 3, 10, 14, 21 et 28 post-infection. La charge bactérienne du groupe OmcBc était réduite aux jours 3, 10 et 14. Au jour 60, les voies génitales ont été isolées pour évaluer l’hydrosalpinx. Les scores de pathologie macroscopique étaient : OmcB:CpG (1,20 ± 0,84), OmcBc:CpG (0,60 ± 0,89), OmcB:FA (1,60 ± 2,19) et OmcBc:FA (0,40 ± 0,55), tous inférieurs au groupe témoin (2,60 ± 1,82). L’infiltration de cellules inflammatoires dans les oviductes des groupes OmcBc:CpG (2,20 ± 1,30) et OmcBc:FA (2,40 ± 1,14) était significativement moindre que dans le groupe témoin (5,00 ± 1,23) (P < 0,05).
Discussion
Cette étude souligne le potentiel d’OmcB et d’OmcBc comme candidats vaccinaux. Les deux protéines induisent une immunité humorale avec une tendance Th1. Cependant, seul OmcBc combiné à des adjuvants induit une sécrétion significative d’IFN-γ, crucial pour l’immunité protectrice. La meilleure protection conférée par OmcBc pourrait s’expliquer par des différences de conformation, de présentation antigénique ou de mécanismes immunitaires spécifiques. Ces résultats mettent en évidence l’importance d’induire à la fois des réponses immunitaires cellulaires et humorales.
Conclusion
OmcBc, en combinaison avec des adjuvants, induit des réponses immunitaires robustes et protège significativement contre l’infection à C. muridarum chez les souris BALB/c. Ces résultats positionnent OmcBc comme un candidat prometteur pour le développement d’un vaccin contre les infections à Chlamydia. Des études futures devront élucider les mécanismes sous-jacents à son efficacité et optimiser les formulations d’adjuvants.
doi.org/10.1097/CM9.0000000000002624